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  • 熒光探針是如何進行分類檢測的?
  • 點擊次數:1902 更新時間:2018-12-21
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  •   熒光探針作用用途:
     
      常用于熒光免疫法中標記抗原或抗體,亦可用于微環境,如表面活性劑膠束、雙分子膜、蛋白質活性位點等處微觀特性的探測。通常要求探針的摩爾吸光系數大,熒光量子產率高;熒光發射波長處于長波且有較大的斯托克斯位移;用于免疫分析時,與抗原或抗體的結合不應影響它們的活性。
     
      也可用于標記待定的核苷酸片斷,用與特異性地、定量地檢測核酸的量。
     
      熒光探針分類檢測:
     
      目前常用的熒光探針有熒光素類探針、無機離子熒光探針、熒光量子點、分子信標等。熒光探針除應用于核酸和蛋白質的定量分析外,在核酸染色、DNA電泳、核酸分子雜交、定量PCR技術以及DNA測序上都有著廣泛的應用。
     
      目前,檢測熒光探針的方法主要有單點測定和電荷耦合裝置熒光成像。由于光電倍增管點掃描時間較長,激光照射強度高,很難抓住熒光早期變化。而CCD熒光成像的面陣大,成像視野廣,成像時間可以調節,因而檢測效果比較好。
     
      化學發光檢測的zui大特點是設備簡單、操作簡便、分析速度快及靈敏度高。化學發光成像分析(CLI)是將化學發光與成像技術相結合,從而具有分辨率高、多樣品同時檢測、光譜響應范圍寬以及靈敏度高等特點[10,11],已廣泛應用于凝膠、蛋白印記及微陣列芯片中的化學發光信號檢測。本實驗建立了TCPO?咪唑?H2O2?熒光探針化學發光成像體系。由于化學發光不需要任何光源,因而在對熒光探針進行化學發光成像檢測時,不存在熒光檢測或者熒光成像時不可避免的光學背景的干擾,從而可以獲得更低的檢出限。用此體系對5種熒光探針進行定量分析,并研究了用四甲基異硫氰酸羅丹明標記的單克隆羊抗人IgG的化學發光成像,檢出限達10-11mol/L,比相同條件下熒光成像的檢出限低一個數量級。
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